Karyotyyppitestin tarkoitus ja vaiheet

Jos lääkäri on suositellut kariotyyppitestiä sinulle tai lapsellesi tai lapsivesitutkimuksen jälkeen, mitä tämä testi merkitsee? Mitä olosuhteita karyotyyppi voi diagnosoida, mitkä ovat testien suorittamisen vaiheet ja mitkä ovat sen rajoitukset?

Mikä on kariotyyppitesti?

Karyotyyppi on valokuva solun kromosomeista. Karyotyypit voidaan ottaa verisoluista, sikiön ihosoluista (lapsivedestä tai istukasta) tai luuytimen soluista.

Karyotyyppitestillä diagnosoidut olosuhteet

Karyotyyppejä voidaan käyttää kromosomaalisten poikkeavuuksien, kuten Downin oireyhtymä ja kissansilmäoireyhtymä, seulomiseen ja vahvistamiseen, ja on olemassa useita erityyppisiä poikkeavuuksia, jotka voidaan havaita.

Kromosomaaliset poikkeavuudet:

• Trisomiat, joissa on kolme kopiota yhdestä kromosomista kahden sijasta
• Monosomia, joissa on vain yksi kappale (kahden sijasta)
• Kromosomideleetioita, joista osa kromosomista puuttuu
• Kromosomien translokaatiot, joissa osa yhdestä kromosomista on kiinnittynyt toiseen kromosomiin (ja päinvastoin tasapainoisissa translokaatioissa).

Esimerkkejä trisomioista ovat:

• Downin oireyhtymä (trisomia 21)
• Edwardin oireyhtymä (trisomia 18)
• Pataun oireyhtymä (trisomia 13)
• Klinefelterin oireyhtymä (XXY ja muut muunnelmat) - Klinefelterin oireyhtymä esiintyy yhdellä 500: sta vastasyntyneestä miehestä
• Triple X -oireyhtymä (XXX)

Esimerkki monosomiasta sisältää:

• Turnerin oireyhtymä (X0) tai monosomia X - Noin 10% ensimmäisen raskauskolmanneksen keskenmenoista johtuu Turnerin oireyhtymästä, mutta tätä monosomia esiintyy vain noin yhdellä 2500 elävällä naispuolisella syntymällä

Esimerkkejä kromosomideleetioista ovat:

• Cri-du-Chat-oireyhtymä (puuttuu kromosomi 5)
• Williamsin oireyhtymä (puuttuu kromosomi 7)

Translokaatiot - On olemassa monia esimerkkejä translokaatioista, mukaan lukien Downlok-oireyhtymä. Robertsonian siirtymät ovat melko yleisiä, ja niitä esiintyy noin yhdellä tuhannesta ihmisestä.

Mosaiikki on tila, jossa joillakin kehon soluilla on kromosomaalinen poikkeavuus, kun taas toisilla ei. Esimerkiksi mosaiikki Downin oireyhtymä tai mosaiikkitrysomia 9. Täysi trisomia 9 ei ole yhteensopiva elämän kanssa, mutta mosaiikkitrisomia 9 voi johtaa elävään syntymään.

Kun se on valmis

On monia tilanteita, joissa lääkäri voi suositella kariotyyppiä. Näitä voivat olla:

• Pikkulapset tai lapset, joilla on sairauksia, jotka viittaavat kromosomaalisiin poikkeavuuksiin, joita ei ole vielä diagnosoitu.
• Aikuiset, joilla on kromosomaaliseen poikkeavuuteen viittaavia oireita (esimerkiksi miehet, joilla on Klinefelterin tauti, voivat jäädä diagnosoimattomiksi murrosikään tai aikuisuuteen saakka.) Jotkut mosaiikkitrisomiahäiriöistä voivat myös olla diagnosoimattomia.
• Lapsettomuus: Lapsettomuuteen voidaan tehdä geneettinen karyotyyppi. Kuten edellä todettiin, jotkut kromosomaaliset poikkeavuudet voivat jäädä diagnosoimattomiksi aikuisuuteen asti. Nainen, jolla on Turnerin oireyhtymä, tai mies, jolla on jokin Klinefelterin muunnelmista, ei ehkä ole tietoinen sairaudesta ennen kuin he selviävät hedelmättömyydestä.
• Prenataalinen testaus: Joissakin tapauksissa, kuten translokaation Down-oireyhtymä, tila voi olla perinnöllinen ja vanhemmat voidaan testata, jos lapsi on syntynyt Downin oireyhtymällä. (On tärkeää huomata, että useimmiten Downin oireyhtymä ei ole perinnöllinen häiriö vaan pikemminkin mahdollisuusmutaatio.)
• Kuolleena syntynyt: Karyotyyppi tehdään usein osana testausta kuolleena syntyneen jälkeen.
• Toistuvat keskenmenot: Vanhempien karyotyyppi toistuvista keskenmenoista voi antaa vihjeitä näiden tuhoisien toistuvien menetysten syistä. Uskotaan, että kromosomaaliset poikkeavuudet, kuten trisomia 16, aiheuttavat vähintään 50% keskenmenoista.
• Leukemia: Karyotyyppitestaus voidaan tehdä myös leukemioiden diagnosoimiseksi esimerkiksi etsimällä Philadelphia-kromosomia, joka löytyy joillakin ihmisillä, joilla on krooninen myelooinen leukemia tai akuutti lymfosyyttinen leukemia.

Vaiheet mukana

Karyotyyppikoe saattaa kuulostaa yksinkertaiselta verikokeelta, mikä saa monet ihmiset miettimään, miksi tulosten saaminen kestää niin kauan. Tämä testi on itse asiassa melko monimutkainen keräämisen jälkeen. Katsotaanpa näitä vaiheita, jotta voit ymmärtää, mitä tapahtuu testin odottamisen aikana.

1. Näytekokoelma

Ensimmäinen vaihe kariotyypin suorittamisessa on kerätä näyte. Vastasyntyneiltä kerätään verinäyte, joka sisältää punasoluja, valkosoluja, seerumia ja muita nesteitä. Karyotyyppi tehdään aktiivisesti jakautuville valkosoluille (tila, joka tunnetaan mitoosina). Raskauden aikana näyte voi olla joko lapsivesitutkimuksen aikana kerätty lapsivesi tai pala istukasta, joka on kerätty korionihan näytteenottotestin (CVS) aikana. Lapsivesi sisältää sikiön ihosoluja, joita käytetään kariotyypin muodostamiseen.

2. Kuljetus laboratorioon

Karyotyypit suoritetaan tietyssä laboratoriossa, jota kutsutaan sytogenetiikan laboratoriona - laboratoriossa, joka tutkii kromosomeja. Kaikissa sairaaloissa ei ole sytogeneettisiä laboratorioita. Jos sairaalallasi tai lääketieteellisellä laitoksellasi ei ole omaa sytogenetiikan laboratoriota, testinäyte lähetetään laboratorioon, joka on erikoistunut kariotyyppianalyysiin. Testinäytteen analysoivat erikoiskoulutetut sytogeneettiset teknologit, Ph.D. sytogeneetikot tai lääketieteelliset geneetikot.

3. Solujen erottaminen

Kromosomien analysoimiseksi näytteen on sisällettävä aktiivisesti jakautuvia soluja. Veressä valkosolut jakautuvat aktiivisesti. Useimmat sikiösolut jakautuvat myös aktiivisesti. Kun näyte saavuttaa sytogeneettisen laboratorion, jakamattomat solut erotetaan jakautuvista soluista erityiskemikaaleilla.

4. Kasvavat solut

Saadakseen tarpeeksi soluja analysoitavaksi jakautuvat solut kasvatetaan erityisissä väliaineissa tai soluviljelmässä. Tämä väliaine sisältää kemikaaleja ja hormoneja, jotka mahdollistavat solujen jakautumisen ja lisääntymisen. Tämä viljelyprosessi voi kestää kolmesta neljään päivään verisoluilla ja jopa viikon sikiösoluilla.

5. Solujen synkronointi

Kromosomit ovat pitkä jono ihmisen DNA: ta. Jotta kromosomit näkyisivät mikroskoopilla, kromosomien on oltava kompaktimmassa muodossaan solunjakautumisvaiheessa (mitoosi), joka tunnetaan metafaasina. Jotta kaikki solut saataisiin tähän erityiseen solunjakautumisvaiheeseen, soluja käsitellään kemikaalilla, joka lopettaa solujen jakautumisen siinä kohdassa, jossa kromosomit ovat pienimmät.

6. Kromosomien vapauttaminen soluistaan

Näiden kompaktien kromosomien näkemiseksi mikroskoopilla kromosomien on oltava poissa valkosoluista. Tämä tapahtuu käsittelemällä valkosoluja erityisellä liuoksella, joka aiheuttaa niiden puhkeamisen. Tämä tehdään, kun solut ovat mikroskooppisella objektilasilla. Valkosoluista jääneet roskat pestään pois jättäen kromosomit kiinni diaan.

7. Kromosomien värjäys

Kromosomit ovat luonnostaan ​​värittömiä. Kromosomin erottamiseksi toisesta levylle levitetään erityinen väriaine nimeltä Giemsa-väriaine. Giemsa-väriaine värjää kromosomialueet, joissa on runsaasti emäksisiä adeniinia (A) ja tymiiniä (T). Värjättyinä kromosomit näyttävät merkkijonoilta, joissa on vaaleat ja tummat nauhat. Jokaisella kromosomilla on erityinen vaalean ja tumman vyöhykkeen kuvio, jonka avulla sytogeneetikko voi erottaa yhden kromosomin toisesta. Jokainen tumma tai vaalea kaista sisältää satoja erilaisia ​​geenejä.

8. Analyysi

Kun kromosomit ovat värjäytyneet, alus asetetaan mikroskoopin alle analysointia varten. Sitten otetaan kuva kromosomeista. Analyysin loppuun mennessä kromosomien kokonaismäärä määritetään ja kromosomit järjestetään koon mukaan.

9. Kromosomien laskeminen

Analyysin ensimmäinen vaihe on kromosomien laskeminen. Useimmilla ihmisillä on 46 kromosomia. Downin oireyhtymää sairastavilla on 47 kromosomia. Ihmisillä voi myös olla puuttuvia kromosomeja, useampi kuin yksi ylimääräinen kromosomi tai osa kromosomista, joka joko puuttuu tai on päällekkäinen. Tarkastelemalla vain kromosomien määrää on mahdollista diagnosoida erilaiset olosuhteet, mukaan lukien Downin oireyhtymä.

10. Kromosomien lajittelu

Kromosomien lukumäärän määrittämisen jälkeen sytogeneetikko aloittaa kromosomien lajittelun. Kromosomien lajittelemiseksi sytogeneettinen lääkäri vertaa kromosomin pituutta, sentromeerien sijoittamista (alueet, joihin kaksi kromatidia ovat liittyneet) sekä G-vyöhykkeiden sijaintia ja kokoja. Kromosomiparit on numeroitu suurimmasta (numero 1) pienimpään (numero 22). Kromosomipareja, joita kutsutaan autosomeiksi, on 22, jotka sopivat yhteen. On myös sukupuolikromosomeja, naisilla on kaksi X-kromosomia, kun taas miehillä on X ja Y.

11. Tarkastellaan rakennetta

Kromosomien ja sukupuolikromosomien kokonaismäärän lisäksi sytogeneettinen asiantuntija tarkastelee myös spesifisten kromosomien rakennetta varmistaakseen, ettei puuttuvaa tai lisäainetta ole, sekä rakenteellisia poikkeavuuksia, kuten translokaatioita. Translaatio tapahtuu, kun osa yhdestä kromosomista on kiinnittynyt toiseen kromosomiin. Joissakin tapauksissa kaksi kromosomikappaletta vaihdetaan (tasapainoinen translokaatio) ja toisinaan ylimääräinen kappale lisätään tai puuttuu pelkästään yhdestä kromosomista.

12. Lopullinen tulos

Lopulta lopullinen kariotyyppi näyttää kromosomien kokonaismäärän, sukupuolen ja mahdolliset rakenteelliset poikkeavuudet yksittäisillä kromosomeilla. Digitaalinen kuva kromosomeista luodaan siten, että kaikki kromosomit on järjestetty numeroiden mukaan.

Karyotyyppitestauksen rajat

On tärkeää huomata, että vaikka kariotyyppitestaus voi antaa paljon tietoa kromosomeista, tämä testi ei voi kertoa sinulle, onko läsnä tiettyjä geenimutaatioita, kuten kystistä fibroosia aiheuttavia geenimutaatioita. Geneettinen neuvonantajasi voi auttaa sinua ymmärtämään, mitä karyotyyppitestit voivat kertoa sinulle ja mitä eivät. Lisätutkimuksia tarvitaan geenimutaatioiden mahdollisen roolin arvioimiseksi taudissa tai keskenmenoissa.

On myös tärkeää huomata, että joskus kariotyyppitestaus ei välttämättä pysty havaitsemaan joitain kromosomaalisia poikkeavuuksia, kuten silloin, kun istukan mosaiikkia esiintyy.

Tällä hetkellä karyotyyppitestaus synnytystä edeltävässä ympäristössä on melko invasiivista, mikä vaatii lapsivesitutkimuksen tai kuorionvillanäytteenoton. Soluvapaan DNA: n arviointi äidin verinäytteessä on kuitenkin nyt yleistä paljon vähemmän invasiivisena vaihtoehtona sikiön geneettisten poikkeavuuksien prenataaliselle diagnoosille.

Sana Verywelliltä

Kun odotat kariotyyppisi tuloksia, saatat tuntea olosi erittäin ahdistuneeksi, ja viikon tai kaksi, joka kestää tulosten saavuttamiseksi, voi tuntua eoneilta. Käytä sitä aikaa nojaaksesi ystävillesi ja perheellesi. Oppiminen joistakin epänormaaleihin kromosomeihin liittyvistä olosuhteista voi myös olla hyödyllistä. Vaikka monet karyotyypille diagnosoiduista olosuhteista voivat olla tuhoisia, monilla ihmisillä on erinomainen elämänlaatu.